有了質量好的志賀氏抗原☁✘│✘,還必須選擇適當的免疫途徑☁✘│✘,才能產生質量好(特異性強和效價高)的
志賀氏血清✘▩₪。下面小編就帶大家瞭解一下血清的採集和儲存✘▩₪。
家兔是常用以產生抗體的動物☁✘│✘,因此這裡主要討論兔血的收集✘▩₪。羊等較大動物以頸靜脈▩•、動脈取血☁✘│✘,鼠等小動物取血可參閱有關資料✘▩₪。取兔血有兩種方法☁✘│✘,一是耳緣靜脈或耳動脈放血☁✘│✘,一是頸動脈入血☁✘│✘,也可心臟採血✘▩₪。取動脈或靜脈放血時☁✘│✘,將兔放入一個特造的木匣或籠內☁✘│✘,耳露於箱(籠)外☁✘│✘,也可由另一人捉住兔身✘▩₪。
剪去耳緣的毛☁✘│✘,用少許二甲苯塗抹耳廓☁✘│✘,30s後☁✘│✘,耳血管擴張▩•、充血✘▩₪。用手輕拉耳尖☁✘│✘,以單面剃鬚刀或尖的手術刀片☁✘│✘,快速切開動脈或靜脈☁✘│✘,血液即流出☁✘│✘,每次可收集30~40ml✘▩₪。然後用棉球壓迫止血☁✘│✘,凝血後洗去二甲苯✘▩₪。
二星期後☁✘│✘,可在另一耳放血☁✘│✘,此法可反覆多次放血✘▩₪。頸動脈放血時☁✘│✘,將兔仰臥☁✘│✘,固定於兔臺☁✘│✘,剪去頸部的毛☁✘│✘,切開皮膚☁✘│✘,暴露頸動脈☁✘│✘,插管☁✘│✘,放血✘▩₪。放血過程中要嚴格按無菌要求進行✘▩₪。
收集的血液置於室溫下1h左右☁✘│✘,凝固後☁✘│✘,置4℃下☁✘│✘,過夜(切勿冰凍)析出血清☁✘│✘,離心☁✘│✘,4000rpm☁✘│✘,10min✘▩₪。在無菌條件☁✘│✘,吸出血清☁✘│✘,分裝(0.05~0.2ml)☁✘│✘,貯於-40℃以下冰箱☁✘│✘,或凍幹後貯存於4✘▩₪。C冰箱儲存✘▩₪。
在免疫期間☁✘│✘,不僅各個不同的動物☁✘│✘,而且同一動物在不同的時間內抗血清效價▩•、特異性▩•、親合力等都可能發生變化☁✘│✘,因而必須經常地採血測試✘▩₪。只有在對抗血清的效價▩•、特異性▩•、親合力等方面作徹底的評價後☁✘│✘,才可使用所取得的志賀氏血清✘▩₪。